technique de Southern

Cet article est extrait de l'ouvrage « Larousse Médical ».

Procédé de biologie moléculaire permettant d'identifier et d'observer une séquence d'A.D.N. ou un gène sans l'isoler.

Cette méthode, mise au point par le Britannique Edward Southern en 1975, comporte plusieurs temps. Elle consiste d'abord à procéder à une extraction d'A.D.N. des noyaux cellulaires à partir d'un prélèvement biologique (sang ou trophoblaste, par exemple). L'A.D.N. est coupé par une enzyme de restriction en segments de tailles différentes, qui sont ensuite soumis à une électrophorèse, laquelle les sépare sous l'action du champ électrique. Les deux brins d'A.D.N. de chaque segment sont ensuite dissociés par réaction alcaline puis transférés sur un support solide. Une sonde nucléique (brin d'A.D.N. marqué permettant de mettre en évidence par hybridation la séquence complémentaire) est ensuite utilisée pour identifier la séquence d'A.D.N. à étudier. Cette séquence et les gènes qu'elle porte peuvent ensuite être visualisés par autoradiographie (un film radiographique placé contre le gène le rend visible en en révélant la radioactivité). Cette méthode permet en quelques jours d'observer n'importe quel gène chez n'importe quelle personne, sans faire appel à l'isolement du gène par la technique du clonage (multiplication et isolement artificiels des gènes). Elle est utilisée dans un but diagnostique pour constater l'altération d'un gène ou vérifier son intégrité, ou comme technique de recherche pour analyser les gènes.